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联系人：罗孝洪
地址：广州市白云区石井石槎路金碧新城5栋904室
邮编：510430
| 产品别名: | 18种氨基酸分离色谱柱 |
| 耗材种类: | 特定应用气相色谱柱 |
产品应用——18种氨基酸的分离
流动相：0.1mol/L醋酸钠溶液(pH 6.50):乙腈＝93:7
水:乙腈＝20:80
柱温：40℃
检测器型号：UV(紫外光检测器)
流动相的配制
色谱柱：PolyPak AminoAcid 4.6×250mm×5μm
流动相A： 0.1mol/L醋酸钠溶液(pH 6.5):乙腈＝93.0:7.0
配制方法：准确称取三水合醋酸钠13.6g于1000mL水中，搅拌均匀，使之溶解，用冰醋酸或氢氧化钠溶液调pH值至6.50；准确量取配制好的三水合醋酸钠溶液930mL和乙腈70mL，混合均匀，抽滤过0.22μm滤膜；
流动相B：水:乙腈＝20.0:80.0
配制方法：准确量取水200mL和乙腈800mL，混合均匀，抽滤过0.22μm滤膜；
衍生化反应
1. 对照品溶液浓度值
Name | M.W. | C(μmol/mL) | Name | M.W. | C(μmol/mL) |
门冬氨酸 | 133.10 | 2.50 | 胱氨酸 | 240.3 | 1.25 |
谷氨酸 | 147.13 | 2.50 | 氯化铵 | 53.49 | 2.50 |
丝氨酸 | 105.09 | 2.50 | 酪氨酸 | 181.19 | 2.50 |
甘氨酸 | 75.067 | 2.50 | 缬氨酸 | 117.15 | 2.50 |
组氨酸 | 155.15 | 2.50 | 蛋氨酸 | 149.21 | 2.50 |
精氨酸 | 174.20 | 2.50 | 异亮氨酸 | 131.17 | 2.50 |
苏氨酸 | 119.12 | 2.50 | 亮氨酸 | 131.17 | 2.50 |
丙氨酸 | 89.093 | 2.50 | 苯丙氨酸 | 165.19 | 2.50 |
脯氨酸 | 115.13 | 2.50 | 赖氨酸 | 146.19 | 2.50 |
2.供试品溶液制备
精密量取/称取供试品适量，并配制成相应浓度的溶液备用。
3.衍生步骤
1)分别将A、B两种衍生试剂用稀释剂稀释至原来浓度的1/5倍；
2)精密量取上述对照品溶液160μL，置于试管中，加入稀释后的A溶液100μL和稀释后的B溶液100μL，摇匀，室温反应60min；然后加入正己烷溶液400μL旋紧盖子后振摇5～10s，室温静置分层，取下层200μL溶液，加入800μL水混合均匀，再取200μL加入800μL水混合均匀，用孔径为0.22μm有机膜过滤，待分析；
3)供试品的衍生步骤与对照品相同，样品衍生后稀释体积可根据样品中氨基酸含量适当稀释。
(注意：供试品样品前处理采用酸解提取，需要在衍生之前进行酸挥干处理，供试品中酸性强度过大在衍生过程中会发生中和，衍生过程必须在碱性条件下，才能够起到衍生化完全。)